關(guān)鍵詞： 小鼠明暗穿箱實(shí)驗(yàn)
目的：本操作規(guī)程是關(guān)于利用小鼠明暗穿箱實(shí)驗(yàn)對(duì)受試物的抗焦慮活性進(jìn)行藥理學(xué)評(píng)價(jià)的具體操作規(guī)程。
背景知識(shí)：無(wú)
原理：動(dòng)物置于明箱中央，背朝隔板。暗箱紅燈不通電，明箱白熾燈照明。造成動(dòng)物焦慮。
主體內(nèi)容（操作步驟）：
實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備
實(shí)驗(yàn)的器材、儀器、藥品
儀器：分析天平，攝像儀，錄像機(jī)，監(jiān)視器，小鼠明暗箱（為一個(gè)上面敞開(kāi)的箱子(45cm×27cm×27cm,上海欣軟信息科技有限公司提供),內(nèi)部分為明箱和暗箱，明箱占箱子的3/5，暗箱占2/5，有一個(gè)高出箱壁20cm的隔板分開(kāi)，隔板的底部開(kāi)一個(gè)7.5cm×7.5cm的方口。明箱內(nèi)涂成白色，由一個(gè)60W的白紙燈泡照明，燈泡高出箱子17cm.暗箱內(nèi)涂成黑色，上方17cm置一個(gè)不通電的紅色燈泡。箱子底部劃上邊長(zhǎng)9cm的方格。）。
器材：紅燈（25W），白熾燈（60W）秒表。
藥品：受試藥、陽(yáng)性對(duì)照藥。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
使用昆明種小鼠，雄性，體重范圍在18~22g之間。飼養(yǎng)于12h一個(gè)循環(huán)的反向明暗轉(zhuǎn)換的環(huán)境中（7am關(guān)燈）10d。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前5-7d每天撫摸動(dòng)物1-2min，減少無(wú)關(guān)刺激對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。對(duì)一般體征進(jìn)行觀察，選用健康狀況良好的動(dòng)物供實(shí)驗(yàn)使用。
溶媒的配制
根據(jù)受試物的性質(zhì)選擇適當(dāng)溶媒，配制后在容器標(biāo)簽上記錄名稱、使用期限、配制日期、配制人。
受試物及陽(yáng)性對(duì)照物的配制
實(shí)驗(yàn)當(dāng)日給藥前將受試物及陽(yáng)性對(duì)照物用溶媒充分溶解或混懸，根據(jù)給藥劑量及給藥容積配制成所需濃度的均勻的溶液或混懸液。
陰性對(duì)照物
原則上以配制受試物及陽(yáng)性對(duì)照物時(shí)使用的溶媒作為陰性對(duì)照物。
實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程（附加資料I）
1 分組 將小鼠稱重后記錄體重，按體重隨機(jī)分組，每組10只。
2 給藥 經(jīng)口給藥,給藥容積為0.1-0.2ml/10g，各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的測(cè)試呈正反交替順序進(jìn)行，記錄給藥時(shí)間。
3 致焦慮 給藥適當(dāng)時(shí)間后，將小鼠置于明箱中央，背朝隔板。實(shí)驗(yàn)于10am至2pm安靜環(huán)境下進(jìn)行，暗箱紅燈不通電，明箱白熾燈照明。每只小鼠測(cè)試后迷路用濕海綿徹底清洗并擦干。
4 記錄實(shí)驗(yàn)過(guò)程 通過(guò)明暗箱上方的攝像機(jī)及與隔壁房間相連的監(jiān)視器和錄像機(jī)觀察和記錄5min內(nèi)小鼠的活動(dòng)情況。
5 數(shù)據(jù)讀取 由不知情的熟練實(shí)驗(yàn)人員觀看實(shí)驗(yàn)錄像帶，分別記錄小鼠穿箱次數(shù)、在明箱停留的時(shí)間及總穿格次數(shù)。
結(jié)果判定
1 穿箱次數(shù)
穿箱次數(shù)以平均值?標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2 明箱停留時(shí)間
明箱停留時(shí)間以平均值?標(biāo)準(zhǔn)差表示。
3 總穿格次數(shù)
總穿格次數(shù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法
在對(duì)照組和給藥組之間以穿箱次數(shù)、明箱停留的時(shí)間及總穿格次數(shù)分別進(jìn)行Student’s t檢驗(yàn)，判斷給藥后有無(wú)顯著性差異。
參考文獻(xiàn)（附加資料II）Nicholas M. Barnes, Celine H.K.Cheng, et al: Prpfiles of interaction of R(+)/S(-)-zacopride and anxiolytic agents in a mouse model. European Journal of Pharcology,218(1992):91-100
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