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Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)流程參考

一、實(shí)驗(yàn)原理與設(shè)備配置


Morris水迷宮通過(guò)利用嚙齒類動(dòng)物對(duì)水的厭惡本能,迫使其尋找隱藏水下平臺(tái)以評(píng)估空間學(xué)習(xí)與記憶能力。該任務(wù)依賴海馬體對(duì)空間線索的整合,廣泛應(yīng)用于阿爾茨海默癥、腦損傷及衰老研究。


  • 設(shè)備要求:
    • 水池:圓形不銹鋼/塑料材質(zhì)(小鼠直徑0.8–1.2m,大鼠1.5–2.0m),水位深度≥30cm(鼠類無(wú)法觸及池底)。
    • 平臺(tái):透明/白色(避免反光),直徑8–12cm(小鼠)或10–15cm(大鼠),平臺(tái)頂面隱藏于水面下1–2cm。
    • 環(huán)境:池壁設(shè)4個(gè)空間標(biāo)志物(如東南西北),水溫恒定22±1℃(恒溫系統(tǒng)控制),光照≤100Lux,隔音環(huán)境(噪音<60dB)。
    • 記錄系統(tǒng):頂部攝像頭連接行為分析軟件(如EthoVision、VisuTrack),自動(dòng)追蹤游泳軌跡




二、標(biāo)準(zhǔn)操作流程

階段1:適應(yīng)期(第1天)

  • 目的:減少動(dòng)物應(yīng)激,熟悉環(huán)境。
  • 步驟:
    1. 平臺(tái)置于隨機(jī)象限,露出水面1cm(可見(jiàn)狀態(tài))。
    2. 動(dòng)物從池壁中點(diǎn)輕柔入水(避免頭浸沒(méi)),自由游泳60秒。若未找到平臺(tái),引導(dǎo)至平臺(tái)并停留15秒。
    3. 重復(fù)4次/鼠,每次起始點(diǎn)不同,間隔≥15分鐘。

階段2:定位航行實(shí)驗(yàn)(空間學(xué)習(xí),第2–6天)

  • 目的:訓(xùn)練動(dòng)物記憶固定平臺(tái)位置。
  • 步驟:
    1. 平臺(tái)隱藏于水下1–2cm(固定象限,如西北象限)。
    2. 每日固定時(shí)段訓(xùn)練4次(如9:00–12:00),每次從隨機(jī)象限入水(4個(gè)象限輪換)。
    3. 記錄逃避潛伏期(找到平臺(tái)時(shí)間),上限90秒。超時(shí)則引導(dǎo)至平臺(tái),停留15秒。
    4. 每只鼠訓(xùn)練后擦干保暖,間隔≥15分鐘再訓(xùn)練。

階段3:空間探索實(shí)驗(yàn)(記憶檢測(cè),第7天)

  • 目的:評(píng)估長(zhǎng)期空間記憶。
  • 步驟:
    • 目標(biāo)象限停留時(shí)間占比
      (原平臺(tái)所在象限)
    • 穿越平臺(tái)次數(shù)
      (原位置中心半徑10cm范圍內(nèi))
    • 游泳路徑效率
      (實(shí)際路徑與理想直線的偏差)
    1. 撤除平臺(tái),動(dòng)物從平臺(tái)對(duì)側(cè)象限入水。
    2. 自由游泳60秒,記錄:


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三、關(guān)鍵指標(biāo)與數(shù)據(jù)分析

  • 學(xué)習(xí)階段指標(biāo):逃避潛伏期(逐日下降趨勢(shì)表明學(xué)習(xí)能力正常)。
  • 記憶階段指標(biāo):
    • 目標(biāo)象限停留時(shí)間>25%(隨機(jī)水平)提示記憶鞏固。
    • 穿越次數(shù)≥3次/60秒表明精準(zhǔn)空間定位。
  • 軟件分析:生成軌跡熱圖、潛伏期曲線,組間比較采用ANOVA分析(p<0.05為顯著)。

四、注意事項(xiàng)與常見(jiàn)問(wèn)題

  1. 老年動(dòng)物適應(yīng)性測(cè)試:
    • 平臺(tái)可見(jiàn)期驗(yàn)證視力及游泳能力,排除運(yùn)動(dòng)障礙干擾。
  2. 應(yīng)激控制:
    • 操作輕柔,避免懸尾應(yīng)激(損傷空間記憶);老年鼠可預(yù)游泳適應(yīng)。
  3. 環(huán)境一致性:
    • 固定測(cè)試時(shí)間(符合晝夜節(jié)律),水面反光需用二氧化鈦消除,外界物品位置不變。
  4. 干擾排除:
    • 性別/品系影響結(jié)果(如C57BL/6小鼠學(xué)習(xí)快于BALB/c),需組內(nèi)一致。

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