在神經(jīng)科學和行為學的研究領(lǐng)域，小鼠懸尾實驗（Tail Suspension Test, TST）作為一種經(jīng)典的行為學測試方法，被廣泛用于評估抗抑郁藥效的療效及探究抑郁樣行為的機制。
實驗準備階段
環(huán)境設(shè)置：實驗的首要條件是營造一個穩(wěn)定且適宜的動物生活環(huán)境。SPF級（無特定病原體）動物房是Zui佳選擇，室溫需嚴格控制在22±2℃，濕度保持在40±20%，模擬小鼠的棲息環(huán)境。此外12小時的晝夜交替周期有助于維持小鼠的正常生理節(jié)律。實驗室應(yīng)保持安靜，遠離噪音源，以減少外界因素對實驗結(jié)果的影響。
設(shè)備與材料準備：
-
實驗箱的設(shè)計，采用55cm高、60cm寬、11.5cm深的塑料箱，內(nèi)部設(shè)置擋板以分隔個體，減少相互干擾。
-
核心設(shè)備包括懸尾裝置，由懸掛桿和固定膠帶組成，用于懸掛小鼠；
-
醫(yī)用膠帶需選擇對皮膚溫和、不易引起過敏的類型；
-
高清攝像設(shè)備確保全程記錄小鼠行為細節(jié)；
-
分析軟件如VisuTrack，能夠自動追蹤并分析視頻數(shù)據(jù)，提高實驗效率和準確性；
-
準備充足的清潔用品，確保實驗后設(shè)備的徹底消殺。
動物準備：實驗對象選用SPF級小鼠，健康無病疾，且已適應(yīng)實驗環(huán)境至少24小時，理想適應(yīng)期為三天。在此期間，小鼠應(yīng)自由攝食飲水，保持正常的晝夜活動模式，以減少因環(huán)境適應(yīng)不適引起的行為偏差。
實驗操作步驟：
動物處理：實驗開始時，以溫和的方式從籠中取出小鼠，避免任何可能增加其壓力的操作。使用醫(yī)用膠帶在距離尾巴尖約1cm處輕輕固定，確保既不影響小鼠呼吸，也不造成疼痛。
實驗設(shè)置：將小鼠尾巴懸掛在裝置上，調(diào)整至鼻尖距離地面約30cm的高度，旨在模擬一種無法逃脫的困境。攝像設(shè)備需預先調(diào)整，確保小鼠全身清晰可見，背景顏色與小鼠形成鮮明對比，便于后續(xù)分析。
行為記錄：錄像開始，持續(xù)6分鐘，但重點分析后4分鐘的不動時間，因為這段時間Zui能反映小鼠的絕望情緒。記錄小鼠的掙扎行為，包括嘗試逃脫、四肢擺動等，以及Zui終進入的不動狀態(tài)，這些都是評估抑郁樣行為的關(guān)鍵指標。
實驗結(jié)束處理：6分鐘后，輕柔地移除膠帶，避免對小鼠造成傷害，并迅速將其放回原籠。隨后，徹底清理實驗區(qū)域，收集所有排泄物，使用專用的清潔劑和消殺劑對實驗設(shè)備進行徹底清潔，確保下次實驗的衛(wèi)生條件。
數(shù)據(jù)分析：
行為分析：利用VisuTrack等分析軟件，計算每只小鼠的不動時間和掙扎行為的持續(xù)時間。通過計算平均不動時間，并與對照組進行比較，可以評估實驗組小鼠是否表現(xiàn)出更多的抑郁樣行為。
統(tǒng)計處理：采用T檢驗來分析實驗組與對照組之間的差異，根據(jù)實驗設(shè)計選擇適合的配對或未配對T檢驗。統(tǒng)計顯著性設(shè)定為P<0.05，意味著兩組之間的差異具有統(tǒng)計學上的意義。
實驗注意事項
-
品種差異不同品種的小鼠可能對懸尾實驗的反應(yīng)不同，因此需設(shè)立相應(yīng)的對照組，以準確評估實驗效果。
-
重復實驗為減少個體差異對結(jié)果的影響，通常避免在同一小鼠上重復實驗。若必須重復，應(yīng)至少間隔半個月，以減少前次實驗可能產(chǎn)生的長期影響。
-
動物福利實驗過程中，必須嚴格遵守動物福利原則，確保所有操作盡可能減少小鼠的應(yīng)激反應(yīng)。
-
自發(fā)活動監(jiān)測實驗前后監(jiān)測小鼠的自發(fā)活動，有助于排除因運動能力差異對實驗結(jié)果造成的干擾。
-
清潔消殺每次實驗后，對實驗設(shè)備和環(huán)境的徹底清潔消殺，是確保實驗衛(wèi)生條件、避免交叉污染的關(guān)鍵步驟。
-
-
在實驗過程中小鼠易在懸吊狀態(tài)下反向攀爬，抱住自己的尾巴不動，特別是C57小鼠。為了避免這一情況的發(fā)生，可采用軟塑管套在小鼠尾巴上，特點是重量輕、表面光滑，小鼠無法抓住。
